慢病毒包裝
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服務(wù)優(yōu)勢更多準現(xiàn)貨最快1-2周,干冰直接送貨到實驗室
病毒穿梭載體齊全,各種標簽和啟動子
病毒使用無憂,專業(yè)技術(shù)員指導(dǎo)
完善的制度和快速的售后體系,解決后顧之憂
慢病毒使用說明:
一、準備貼壁細胞第1天,在24孔培養(yǎng)板(以此為例)接種若干孔,每 個孔內(nèi)接種3~5×10的4次方個目的細胞,以便進 行病毒感染時細胞的融合度約為70%。
第2天,觀察細胞生長狀態(tài),如細胞狀態(tài)較好則開 始侵染。
二、
病毒侵染取出-80℃的儲存的病毒,在冰上融化后,瞬時離心。 使用含血清、不含抗生素的培養(yǎng)基,根據(jù)MOI 配制 慢病毒稀釋液(可設(shè)置不同MOI)。根據(jù)需要添加 Polybrene, 添加時需要設(shè)置合適的濃度吸去原細 胞培養(yǎng)器皿中的培養(yǎng)基,添加配制好的慢病毒稀釋 液?;靹蚝蠓庞诙趸寂囵B(yǎng)箱(37℃、5%的二氧化 碳)孵育過夜。
三、
去除病毒第3天,更換培養(yǎng)液。一般在24小時候內(nèi)將含有慢 病毒的培養(yǎng)液更換成正常培養(yǎng)液;如果侵染對細 胞有明顯毒性作用而影響細胞生長狀態(tài),可以在 8-12小時更換培養(yǎng)液。
四、
檢測結(jié)果第4天,帶熒光標簽的慢病毒可通過倒置熒光顯微 鏡進行侵染效果評估;帶螢火蟲熒光素酶標簽的病 毒可通過熒光素酶實驗進行侵染效果評估:也可通 過qPCR 或WB 進行侵染效果評估。
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